Анализ на субпопуляцию лимфоцитов крови

Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD56

Анализ на субпопуляцию лимфоцитов крови

[20-077] Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD56

4035 руб.

Исследование включает в себя определение абсолютных и относительных значений субпопуляционного состава лимфоцитов (CD3, CD4, CD8, CD19, CD56). Рекомендуется к назначению для контроля показателей клеточного звена иммунной системы в динамике после комплексного иммунологического обследования.

Синонимы русские

Иммунофенотипирование, клеточный иммунитет, многоцветный клеточный анализ методом проточной цитометрии, субпопуляции лимфоцитов.

Синонимы английские

Human Immune System, Immunophenotyping, Multicolor Flow Cytometry Cell Analysis, Human Leukocyte Differentiation Antigens.

Метод исследования

Проточная цитометрия.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
  • Детям в возрасте до 1 года не принимать пищу в течение 30-40 минут до исследования.
  • Детям в возрасте от 1 до 5 лет не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования.
  • Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
  • Полностью исключить (по согласованию с врачом) прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием.
  • Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 24 часов до исследования.
  • Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Оценка клеточного состава (иммунофенотипирование) лимфоцитов крови человека – основной компонент в оценке иммунного статуса – выполняется методом проточной цитофлуориметрии.

Иммунофенотипирование – характеристика клеток при помощи моноклональных антител или каких-либо других зондов, позволяющих судить об их типе и функциональном состоянии по наличию того или иного набора клеточных маркеров.

Иммунофенотипирование лейкоцитов заключается в обнаружении на их поверхности маркеров дифференциации, или CD антигенов. Лейкоциты экспрессируют ряд поверхностных и цитоплазматических антигенов, уникальных для своей субпопуляции и стадии развития. CD антигены (англ.

cluster of differentiation antigens) – это антигены на поверхности клеток, маркеры, отличающие одни типы клеток от других. Дифференциации этих антигенов изучены и стандартизованы, им присвоены определенные номера.

CD могут быть распознаны с помощью соответствующих моноклональных антител.

Используя флюоресцентно-меченые моноклональные антитела, связывающиеся с определенными CD, можно с помощью метода проточной цитометрии произвести подсчёт содержания лимфоцитов, относящихся к различным по функции или стадии развития субпопуляциям.

В основе проточной цитофлуориметрии лежит проведение фотометрических и флюоресцентных измерений отдельных клеток, пересекающих одна за другой вместе с потоком жидкости луч монохроматического света, обычно света лазера.

Метод позволяет не только определить количественное соотношение основных популяций лимфоцитов:

  • Т-лимфоциты (CD3+CD19-);
  • Т-хелперы/индукторы (CD3+CD4+CD45+);
  • Т-цитотоксические лимфоциты (Т-ЦТЛ) (CD3+CD8+CD45+);
  • истинные “натуральные киллеры” (NK-клетки) (CD3-CD56+CD45+);
  • В-лимфоциты (CD19+CD3-);

– но и оценить малые клеточные популяции, а также изучить их функциональную активность:

  • Т-лимфоциты, экспрессирующие маркеры NK-клеток(Т-NK-клетки) (CD3+CD56+CD45+);
  • NK-клетки, экспрессирующие α-цепь антигена CD8 (CD3-СD8+CD45+).

Когда назначается исследование?

Рекомендовано для комплексного обследования пациентов, входящих в группу риска по четырем основным иммунопатологическим синдромам.

С инфекционным синдромом:

  • частые ОРВИ, хронические инфекции ЛОР-органов (гнойные синуситы, отиты, периодически встречающиеся лимфадениты, пневмонии с тенденцией к рецидивированию, бронхоплевропневмонии);
  • бактериальные инфекции кожи и подкожной клетчатки (пиодермии, фурункулез, абсцессы, флегмоны, септические гранулемы, рецидивирующий парапроктит у взрослых);
  • урогенитальные инфекции;
  • грибковые поражения кожи и слизистых оболочек, кандидоз, паразитарные инвазии;
  • рецидивирующий герпес различной локализации;
  • гастроэнтеропатия с хронической диареей неясной этиологии, дисбактериозом;
  • длительный субфебрилитет, лихорадка неясной этиологии;
  • генерализованные инфекции: сепсис, гнойные менингиты.

С аллергическим (атопическим) синдромом:

  • атопический дерматит;
  • нейродермит;
  • экзема с инфекционным компонентом;
  • тяжелая атопическая бронхиальная астма, поллиноз, хронический астматический бронхит.

С аутоиммунным синдромом:

  • ревматоидный артрит;
  • рассеянный склероз;
  • диффузные заболевания соединительной ткани (системная красная волчанка, склеродермия, дерматомиозит);
  • аутоиммунный тиреоидит;
  • неспецифический язвенный колит.

С иммунопролиферативным синдромом:

  • опухолевые процессы в иммунной системе (лимфомы, болезнь Ходжкина, острый и хронический лимфолейкоз, саркома Капоши).

Что означают результаты?

Изменения различных клеточных популяций лимфоцитов в сторону повышения или понижения развиваются при различных патологических процессах в организме, таких как инфекции, аутоиммунные и онкологические заболевания, иммунодефициты, в постоперационном периоде, при трансплантации органов.

Ниже представлена таблица с клиническими ситуациями, которые могут приводить к изменениям в субпопуляционном составе лимфоцитов.

Субпопуляция лимфоцитовПовышение показателяСнижение показателя
T-лимфоциты(CD3+CD19-)
  • Острые и хронические инфекции;
  • гормональный дисбаланс;
  • длительный прием лекарственных препаратов (особенно монотерапия);
  • прием биологически активных добавок;
  • интенсивные занятия спортом;
  • беременность;
  • Т-клеточные лейкозы.
  • Некоторые виды инфекций;
  • иммунодефицитные состояния;
  • алкогольный цирроз печени;
  • карцинома печени;
  • аутоиммунные заболевания;
  • прием иммуносупрессивных препаратов.
Т-хелперы(CD3+CD4+CD45+)
  • Ряд аутоиммунных заболеваний;
  • гормональный дисбаланс;
  • некоторые инфекции;
  • отдельные Т-клеточные лейкозы;
  • отравление солями бериллия.
  • Иммунодефицитные состояния (основной лабораторный признак вторичного иммунодефицита);
  • алкогольная болезнь печени;
  • аутоиммунные заболевания;
  • прием иммуносупрессивных    препаратов или стероидов.
Т-цитотоксические лимфоциты (CD3+CD8+CD45+)
  • Некоторые вирусные инфекции;
  • ряд Т-клеточных лейкозов;
  • наркоз;
  • острая фаза аллергии;
  • ряд аутоиммунных патологий.
 

  • Некоторые виды аутоиммунных, аллергических заболеваний;
  • иммуносупрессивная терапия.
В-лимфоциты(CD19+CD3-)
  • Ряд аутоиммунных патологий;
  • стресс;
  • В-клеточные лимфомы;
  • длительная экспозиция формальдегидом.
  • Гипореактивность, перераспределение в очаги воспаления;
  • общий вариабельный иммунодефицит;
  • наследственный иммунодефицит;
  • внутривенное введение иммуноглобулинов;
  • алкогольный цирроз печени.
“Натуральные киллеры”(CD3-CD56+CD45+), (CD3-CD16+CD45+)
  • Фаза восстановления после вирусных инфекций (гепатит В, С);
  • ряд аутоиммунных заболеваний;
  • онкологические заболевания;
  • беременность;
  • алкогольный цирроз печени.
  • Ряд инфекций;
  • ряд аутоиммунных заболеваний;
  • интенсивное курение;
  • иммуносупрессивная терапия и терапия стероидами.
Т-“натуральные киллеры”, НК-Т(CD3+CD56+CD45+)
  • Длительные хронические воспалитель­ные процессы;
  • тяжелое течение воспалительных процессов;
  • длительная персистенция антигена в организме.
Не имеет диагнос­тического значения.

В совокупности с клиническими данными, симптоматикой, другими методами лабораторных исследований вышеуказанные изменения являются диагностическим признаком возникновения этих патологических процессов в организме человека.



Важные замечания

  • Результаты данного исследования необходимо сопоставлять с клиническими данными и показателями других лабораторных анализов.
  • Следует отметить, что оценка показателей в динамике существенно повышает клиническую значимость исследования.

Литература

  1. Хаитов, Р.М. Аллергология и иммунология : национальное руководство / под ред. Р.М. Хаитова, Н.И. Ильиной. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 656 с.
  2. Хаитов, Р.М. Руководство по клинической иммунологии. Диагностика заболеваний иммунной системы : руководство для врачей / Р.М. Хаитов, Б.В. Пинегин, А.А. Ярилин. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 352 с.
  3. Зуева Е.Е. Иммунная система, иммунограмма : рекомендации по назначению и применению в лечебно диагностическом процессе /Е.Е Зуева, Е.Б. Русанова, А.В. Куртова, А.П. Рыжак, М.В. горчакова, О.В. Галкина – СПб. – Тверь: ООО «издательство «Триада», 2008. – 60 с.
  4. Кетлинский, С.А. Иммунология для врача / С.А. Кетлинский, Н.М. Калинина. СПб. : Гиппократ, 1998. – 156 с. Ярилин, А.А. Иммунология : учебник / А.А. Ярилин. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2010. – 752 с.
  5. Хаитов, Р.М. Иммунология : атлас / Р.М. Хаитов, А.А. Ярилин, Б.В. Пинегин.М. : ГЭОТАР-Медиа, 2011. – 624 с.
  6. Хаитов, Р.М. Иммунология : учебник / Р.М. Хаитов. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 320 с.
  7. Хаитов, Р.М. Оценка иммунного статуса человека в норме и при патологии / Р.М. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. – 2001. – N4. – С. 4–6.
  8. Whiteside, T.L. Role of Human Natural Killer Cells in Health and disease / T.L. Whiteside, R.B. Herberman // Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. – 1994. – Vol. 1, №2. – P. 125–133.
  9. Ginadi, L. Differential expression of T-cell antigens in normal peripheral blood lymphocytes : a quantitative analysis by flow cytometry / L. Ginadi, N. Farahat, E. Matutes [et al.] // J. Clin. Pathol. – 1996. – Vol. 49, № 1. – P. 539–544.
  10. Merser, J.C. Natural killer T-cells : rapid responders controlling immunity and disease / J.C. Merser, M.J. Ragin, A. August // International J. Biochemistry & Cell Biology. – 2005. – № 37. – P. 1337–1343.
  11. Никитин, В.Ю. Маркеры активации на Т-хелперах и цитотокси ческих лимфоцитахна различных стадиях хронического вирусного гепатита С / В.Ю. Никитин, И.А. Сухина, В.Н. Цыган [и др.] // Вестн. Рос. Воен.-мед. акад. – 2007. – Т. 17, № 1. – С. 65–71.
  12. Boettler, T. T cells with CD4+CD25+ regulatory phenotype suppress in vitro proliferation of virus-specific CD8+ T cells during chronic hepatitis C virus infection / T. Boettler, H.C. Spangenberg, C. Neumann-Haefelin [et al.] // J. Virology. − 2005. − Vol. 79, N 12. −P. 7860–7867.
  13. Ormandy, L.A. Increased Populations of Regulatory T Cells in Peripheral Blood of Patients with Hepatocellular Carcinoma / L.A. Ormandy, T. Hillemann, H. Wedemeyer [et al.] // J. Cancer Res. − 2005. − Vol. 65, N 6. − P. 2457–2464.
  14. Sakaguchi, S. Naturally arising FoxP3-expressing CD4+CD25+ regulatory T cells in immunological tolerance to self- and non-self / S. Sakaguchi // Nature Immunol. − 2005. −Vol. 6, N 4. − P. 345–352.
  15. Romagnani, S. Regulation of the T cell response / S. Romagnani // Clin. Exp. Allergy. – 2006. − Vol. 36. − P. 1357–1366.
  16. Хайдуков С.В., Основные и малые популяции лимфоцитов периферической крови человека  и их нормативные значения  (метод многоцветного цитометрического анализа) /Хайдуков С.В., Зурочка А.В., Тотолян А.А., Черешнев В.А.  // Мед. иммунология. – 2009. -Т. 11 (2-3). – С. 227-238.

Источник: https://helix.ru/kb/item/20-077

Субпопуляции лимфоцитов крови

Анализ на субпопуляцию лимфоцитов крови

Оценка состояния иммуной системы

Общая характеристика

Данное исследование позволяет охарактеризовать лимфоцитарное звено клеточного иммунитета: процентное соотношение основных субпопуляций, их абсолютное количество в крови, а также уровень активации. CD3+ – основной маркер Т-лимфоцитов. Т-клетками называют большую группу лимфоцитов, окончательная дифференциация которых проходит в тимусе.

Они принимают участие в противовирусном иммунном ответе, аллергических реакциях замедленного типа, реакциях отторжения трансплантата, обеспечивают противоопухолевый иммунитет. Т-клетки могут быть как исполнительными клетками иммунитета (т.н.

эффекторами, к ним относят цитотоксические лимфоциты, CD8+) так и регулировщиками иммунного ответа (хелперные лимфоциты, CD4+). CD3+CD16/56+ – цитолитические Т-лимфоциты. На поверхности данных клеток присутствуют маркеры, свойственные как Т-лимфоцитам, так и NK-клеткам, поэтому данную субпопуляцию называют ТNK- лимфоцитами.

Они проявляют уникальный спектр свойств: способность к цитолизу (разрушению) вирус-инфицированных и онкогенных клеток с одной стороны, и цитокин-продуцирующую активность с другой. HLA-DR+ – маркер поздней и длительной активации клеток.

Позитивные по HLA-DR лимфоциты длительно циркулируют в крови, а экспрессия этого маркера наиболее полно отражает активационное состояние клеток. CD3+CD4+ – Т-хелперы принимают участие в индукции специфического иммунного ответа.

Одной из важных их функций является выработка цитокинов, которые влияют на все звенья воспалительного процесса, и могут направлять иммунный ответ на преимущественно гуморальный или цитотоксический путь и регулировать его интенсивность. CD3+CD8+ – цитотоксические Т-лимфоциты.

Их функция состоит в уничтожении собственных клеток, зараженных вирусами, опухолевых клеток и др. RCD3+CD4+/CD3+CD8+ индекс представляет собой соотношение субпопуляций Т-хелперов и Т-цитотоксических лимфоцитов. На разных этапах воспалительного процесса их количество в крови меняется, но в норме соотношение не опускается ниже единицы и не поднимается выше 2,5.

Однако, при тяжелых воспалительных, септических процессах, на фоне иммунодефицитов (включая СПИД) и некоторых аутоиммунных заболеваний данный показатель значительно отклоняется от нормального диапазона. CD3+CD4+CD8+ – т.н.«двойные позитивы». В норме клетки с подобным фенотипом в кровотоке присутствуют в незначительном количестве.

Они представляют собой высокодифференцированные клетки памяти, либо те клетки, которые не прошли отрицательную селекцию в тимусе. CD3+CD4-CD8 – т.н.«двойные негативы» – незрелые Т-лимфоциты, которые не экспрессируют ни маркер Т-хелперов, ни маркер Т-цитотоксических клеток.

Доля таких клеток среди прочих Т-лимфоцитов несколько возрастает во время активного выхода лимфоцитов из органов кроветворения, либо при нарушениях функции тимуса.Часто львиная доля даблнегативных Т-клеток является гамма/дельта-Е-клетками. CD19+ – основной маркер В-лимфоцитов. Данные клетки являются важнейшим звеном гуморального иммунного ответа. CD56/CD16+  NK-клетки (натуральные киллеры) представляют собой особую популяцию больших гранулярных лимфоцитов. Эти клетки способны лизировать клетки-мишени, инфицированные вирусами и другими внутриклеточными агентами, мутировавшие опухолевые клетки, а также любые другие клетки аллогенного или ксеногенного происхождения.

Показания для назначения

1. Рецидивирующие инфекции, инфекционные заболевания с хроническим и затяжным течением. 2. Подозрение на генетически обусловленный или приобретённый иммунодефицит. 3. Аутоиммунные заболевания. 4. Аллергические заболевания. 5. Контроль терапии цитостатиками, иммунодепрессантами и иммуномодуляторами.

Маркер

Маркер выявления первичного или вторичного иммунодефицита и контроль проведения иммуностимулирующей терапии.

Клиническая значимость

Определение содержания основных субпопуляций лимфоцитов имеет диагностическое значение при первичных и вторичных иммунодефицитных, лимфопролиферативных заболеваниях и ВИЧ-инфекции.

активированных Т-лимфоцитов может повышаться при иммунной активации, вызванной инфекцией или отторжением трансплантата.

Идентификация субпопуляций может также применяться для оценки тяжести, длительности лечения и прогноза исхода заболевания, оценки эффективности проводимого лечения.

Лечащий врач должен больше обращать внимание на соответствие характера отклонения показателя, значимого при той или иной патологии, клинической картине заболевания. Иными словами, фенотипирование лимфоцитов используется для подтверждения или опровержения диагноза, а также для мониторинга состояния иммунной системы пациента в процессе лечения.

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: %

Референтные значения:

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: %

Референтные значения:

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: %

Референтные значения:

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: %

Референтные значения:

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: %

Референтные значения:

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: Миллиардов на литр

Референтные значения:

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: %

Референтные значения:

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: %

Референтные значения:

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: %

Референтные значения:

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: Миллиардов на литр

Референтные значения:

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: %

Референтные значения:

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: Миллиардов на литр

Референтные значения:

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: %

Референтные значения:

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: Миллиардов на литр

Референтные значения:

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: %

Референтные значения:

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: Миллиардов на литр

Референтные значения:

Метод: Проточная цитометрия

Референтные значения:

Биологический материал

Условия доставки

Контейнер

Объем

Цельная кровь

Условия доставки:

24 Час. при температуре от 20 до 25 градусов Цельсия

Контейнер:

Вакутейнер с натрий-гепарином

Стандартные условия: Период голодания 8 часов (если другое 
не определено врачом).  Можно пить
воду.  Биоматериал принимается в
соответствии с графиком взятия биоматериала в отделении МЛ ДІЛА.

  Накануне исследования необходимо исключить физические нагрузки (спортивные тренировки) и курение.

Детям до 5 лет и взрослым с противопоказаниями по голоданию, допускается легкий прием нежирной пищи хотя бы за 2 часа до сдачи БМ

Вы можете добавить данное исследование в корзину на этой странице

Интерференция:

  • см. комплексную иммунограмму
  • см. комплексную иммунограмму

Интерпретация:

  • Количество Т-лимфоцитов (CD3+) Повышение относительного и/или абсолютного количества Т-лимфоцитов в большинстве случаев носит транзиторный характер, особенно, если оно не сопровождается существенными сдвигами в других субпопуляциях лимфоцитов. Повышение относительного и/или абсолютного количетва Т-лимфоцитов, сопровождающееся повышение Т-хелперов (CD3+CD4+), является наиболее характерным для аутоиммунных заболеваний, свидетельствует об активизации аутоиммунного процесса, особенно при повышении Т-клеток.Повышение Т-хелперов,снижение Т-супрессоров/цитотоксинов, В-лимфоцитов и натуральних киллеров – могут наблюдаться у женщин в менопаузальном периоде и лиц обоих полов в пожилом возрасте.Количество цитолитических Т-лимфоцитов (CD3+CD16/56+).Повышение свидетельствует о развитии активного иммунного ответа, вирусная природа воспаления.Количество активированных Т-лимфоцитов (CD3+HLA-DR+).Повышение свидетельствует о наличии очага антигенного раздражения. В остром периоде инфекционно-воспалительного заболевания и в течение 1-2 месяцев после него такое повышение следует расценивать как естественное, в других ситуациях оно является признаком наличия хронического воспаления.Количество Т-хелперов (CD3+CD4+)Повышено при следующих заболеваниях:• острый Т-лимфобластный лейкоз;• хронический Т-лейкоз;• синдром Сезари (Т-лейкоз взрослых);• системная красная волчанка, ревматоидный артрит;• Тимома;• гиперактивность иммунитета.Количество Т-цитотоксических лимфоцитов (CD3+CD8+)Повышение при острой вирусной инфекции (сопровождается незначительным повышением Т-лимфоцитов и соотношения CD4/CD8).• Начальная стадия СПИДа.• Острая вирусная инфекция.• Корь.• Парапротеинемия.• Малярия.• Аутоиммунные заболевания.• Множественная миелома.• Хронический вирусный гепатит.• Сепсис.• Гемофилия.• Шистосомоз.• Солидная плазмоцитома.• Инфекционный мононуклеоз.• Абсцесс легкого, почки.• Перитонит.Соотношения CD4/CD8Повышение: лимфолейкоз, тимома, синдром Сезари, болезнь Вегенера.Количество CD3+CD4+CD8+«двойных позитивов» Повышение клеток может быть обусловлено значимой вирусной нагрузкой либо свидетельствовать о наличии аутоиммунного компонента в характере иммунного реагирования.Имеются сведения об увеличении CD4+CD8+ лимфоцитов в периферической крови при различных патологических состояниях, например, мононуклеозе, вызванном вирусом Эбштейна-Барра, ВИЧ-инфекции, хроническом лимфолейкозе, миастении, рассеянном склерозе, идиопатической тромбоцитопенической пурпуре и др.Количество CD3+CD4-CD8 – «двойные негативы»Повышение при нарушении созревания Т-клеток – острый или активный хронический воспалительный процесс, при аутоиммунных заболеваниях, воздействии ионизирующего излучения.Количество В-лимфоцитов (CD19+)Повышение при таких состояниях как:• Острые и хронические бактериальные, грибковые и паразитарные инфекции.• Хронические заболевания печени, цирроз.• Аутоиммунные заболевания (СКВ, ревматоидный артрит).• Хронический лимфолейкоз.• Миеломная болезнь.• Макроглобулинемия Вальденстрема.• Туберкулез.• Моноклональная гаммапатия.Повышение В-лимфоцитов выявляется редко (наблюдается при снижении уровня Т-лимфоцитов и натуральных киллеров, отражая изменения в других лимфоцитарных субпопуляциях – сумма Т-, В-лимфоцитов и натуральных киллеров составляет 100+10%). Повышение относительного и абсолютного количества В-лимфоцитов может наблюдаться при инфекции вирусом Эпштейна-Барра и лимфопролиферативных заболеваниях.Количество NK-клеток (CD3-СD16/56+).Повышение количества натуральных киллеров, сопровождающееся снижением В-лимфоцитов, а также CD3+ и/или CD3+CD4+ клеток, наиболее характерно для хронического воспалительного процесса, в периоде реконвалесценции. Отсутствие восстановления этих показателей до нормы более чем через 1 месяц после выздоровления свидетельствует о хронизации инфекционно-воспалительного процесса.Повышение как относительного и/или абсолютного количества натуральных киллеров, так и CD3+CD8+ цитотоксических Т-л
  • Количество Т-лимфоцитов (CD3+) Снижение относительного и абсолютного количества Т-лимфоцитов свидетельствует об ослаблении защитных сил организма и развитии гипоиммунного состояния или иммунодефицита. Снижение Т-лимфоцитов до 0,7х109 позволяет предположить, а до 0,5х109 – поставить диагноз иммунодефицит. В этом случае следует также обратить внимание на другие лабораторные показатели, а именно наличие CD4 лимфопении, vCD4/CD8 (

Источник: https://dila.ua/rus/labdir/392.html

Основные субпопуляции лимфоцитов

Анализ на субпопуляцию лимфоцитов крови

Исследование основных субпопуляций лимфоцитов – профильный анализ крови, при котором определяется уровень нескольких видов лимфоцитов, различающихся по функциям и стадиям развития.

Комплекс включает в себя исследование Т-лимфоцитов, Т-хелперов, Т-цитотоксических лимфоцитов, B-лимфоцитов, EK-клеток, T-EK-клеток, расчет иммунорегуляторного индекса, определение общего количества лимфоцитов. Анализ находит применение в иммунологии, инфекционистике, онкологии, хирургии.

Показан при рецидивирующих и хронических инфекциях, состояниях иммунодефицита, аутоиммунных, аллергических и онкологических заболеваниях, при подготовке к операциям. Материалом для исследования является цельная кровь. Анализ выполняется методом проточной цитофлуориметрии.

Для каждой субпопуляции лимфоцитов существуют определенные значения нормы. Подготовка результатов занимает около 2 дней.

Исследование основных субпопуляций лимфоцитов – профильный анализ крови, при котором определяется уровень нескольких видов лимфоцитов, различающихся по функциям и стадиям развития.

Комплекс включает в себя исследование Т-лимфоцитов, Т-хелперов, Т-цитотоксических лимфоцитов, B-лимфоцитов, EK-клеток, T-EK-клеток, расчет иммунорегуляторного индекса, определение общего количества лимфоцитов. Анализ находит применение в иммунологии, инфекционистике, онкологии, хирургии.

Показан при рецидивирующих и хронических инфекциях, состояниях иммунодефицита, аутоиммунных, аллергических и онкологических заболеваниях, при подготовке к операциям. Материалом для исследования является цельная кровь. Анализ выполняется методом проточной цитофлуориметрии.

Для каждой субпопуляции лимфоцитов существуют определенные значения нормы. Подготовка результатов занимает около 2 дней.

Основные субпопуляции лимфоцитов – группы клеток иммунной системы, различающиеся по функциям, происхождению, стадиям развития и поверхностным антигенным маркерам.

Принадлежность к той или иной субпопуляции определяет роль лимфоцитов в формировании иммунного ответа, их расположение в лимфоидных органах, особенности циркуляции в кровеносной и лимфатической системе.

Фенотипирование лимфоцитов необходимо для установления природы инфекционного агента, оценки состояния пациента, определения активности иммунной системы и необходимости медикаментозной терапии, контроля течения заболевания и составления прогноза.

При исследовании основных субпопуляций лимфоцитов выделяют несколько их групп. Т-лимфоциты созревают в тимусе, участвуют в клеточном иммунном ответе, регулируют функции B-лимфоцитов, ответственных за выработку антител.

Т-хелперы распознают антигены и регулируют иммунный ответ через выработку цитокинов – сигнальных, информационных пептидов.

Т-цитотоксические лимфоциты идентифицируют фрагмент антигена на поверхности клетки-мишени, направляют гранулы в область контакта с инфекционным агентом и запускают лизис поврежденной клетки.

B-лимфоциты при контакте с антигеном делятся и дифференцируются в плазматические клетки, синтезирующие антитела. EK-клетки обладают естественной цитотоксической активностью, обеспечивают лизис поврежденных клеток-мишеней. T-EK-клетки имеют признаки Т-лимфоцитов, являются естественными неиммунными киллерами.

При выполнении комплексного исследования основных субпопуляций лимфоцитов определяется также общее количество лимфоцитов (абсолютное значение) и рассчитывается иммунорегуляторный индекс – соотношение Т-хелперов и Т-цитотоксических лимфоцитов. Для проведения анализа используется метод проточной цитофлуориметрии и иммуноферментный метод, забор крови производится из вены. Полученные результаты применяются в иммунологии, инфекционистике, ревматологии, онкологии, хирургии.

Показания

Исследование основных субпопуляций лимфоцитов используется для диагностики первичного и вторичного иммунодефицита. Вне зависимости от его типа основным и нередко единственным проявлением становятся инфекции затяжного или рецидивирующего характера.

Чаще всего у пациентов определяется бактериальное поражение дыхательных путей с характерными симптомами – болью в горле, кашлем, насморком. Типичны инфекции желудочно-кишечного тракта, сопровождающиеся диареей, рвотой, синдромом мальабсорбции.

Кроме этого, иммунодефицит может проявляться оппортунистическими инфекциями – цитомегаловирусной инфекцией, кандидозом, пародонтитом, конъюнктивитом, экземой, бородавками и папилломами.

В более редких случаях нарушения иммунной системы сопровождаются гемолитическими патологиями (анемией, лейкопенией, тромбоцитопенией), неврологическими симптомами (судорожными припадками), онкологическими и аутоиммунными заболеваниями. Анализ на определение основных субпопуляций лимфоцитов в крови назначается пациентам при подготовке к операциям, до и после трансплантации органов, при послеоперационных осложнениях, а также для контроля лечения иммуномодуляторами и цитостатиками.

Геморрой в 79% случаев убивает пациента

При интерпретации результатов всегда учитывается, что соотношение основных субпопуляций лимфоцитов может не отражать их реального участия в иммунологических процессах.

Поэтому данное исследование дополняется анализами на иммуноглобулины, ЦИК, компоненты системы комплемента.

Преимуществом фенотипирования лимфоцитов является то, что анализ позволяет более точно судить о протекании основных реакций защитной системы в отличие от теста на общее количество лимфоцитов.

Подготовка к анализу и забор материала

Основные субпопуляции лимфоцитов исследуются в венозной крови. Процедуру забора биоматериала рекомендуется выполнять с утра, натощак.

За день до исследования нужно воздержаться от употребления алкоголя, а также от тяжелых физических нагрузок. За три часа до процедуры следует отказаться от курения, избегать эмоционального напряжения.

Кровь берется методом венепункции, хранится и транспортируется в пробирках с антикоагулянтом.

Исследование основных субпопуляций лимфоцитов выполняется методом проточной цитофлуориметрии, иногда – иммуноферментным методом. Проточная цитофлуориметрия основана на идентификации различных видов лимфоцитов с помощью лазера, то есть на основе характеристик светорассеяния и интенсивности луча.

Иммуноферментный метод основан на том, что на поверхности лимфоцитов присутствуют различные антигены, уникальные для определенных популяций. Их обнаружение выполняется с помощью меченных ферментом моноклональных антител, количество определяется на основе изменения окраски (оптической плотности) образца.

Подготовка результатов анализа занимает до 2-3 дней.

Нормальные значения

Значения нормы для анализа на основные субпопуляции лимфоцитов в крови зависят от возраста, определяются в абсолютном значении и в % от общего количества лимфоцитов:

  • Т-лимфоциты: для детей до 16 лет – 1400-6450*106/л (45-81%), для взрослых – 800-2400*106/л (60-89%);
  • Т-хелперы: для детей до 16 лет – 700-5116*106/л (31-64%), для взрослых – 540-1400*106/л (31-61%);
  • Т-цитотоксические лимфоциты: для детей до 16 лет – 600-2490*106/л (16-38%); для взрослых – 210-1200*106/л (14-36%);
  • B-лимфоциты: для детей до 16 лет – 300-1500*106/л (12-31%), для взрослых – 100-480*106/л (5-19%);
  • EK-клетки: для детей до 16 лет – 100-1330*106/л (2-27%), для взрослых – 78-470*106/л (4-26%);
  • EKT-клетки: для детей до 16 лет – 0-10%; для взрослых – 1-13% (абсолютное значение не определяется);
  • иммунорегуляторный индекс: от 1 до 3,5.

Для детей значения нормы могут быть определены более точно согласно возрасту. Физиологическое изменение показателей анализа возможно при физической нагрузке, эмоциональном стрессе, охлаждении, после приема пищи.

Повышение уровня лимфоцитов

Причиной повышения уровней основных субпопуляций лимфоцитов в крови является воспалительный процесс.

Количество Т-лимфоцитов увеличивается при иммунном воспалении; количество Т-хелперов – при острых инфекционных, аллергических и аутоиммунных заболеваниях; количество Т-цитотоксических лимфоцитов – при острых внутриклеточных инфекциях, онкологических патологиях; количество B-лимфоцитов – при острых и хронических инфекциях, аллергиях и аутоиммунных заболеваниях; количество EK-клеток – при острых инфекциях с избытком бактериального или вирусного антигена, при онкопроцессах; количество TEK-клеток – при хронических инфекциях, длительной персистенции антигена.

Снижение уровня лимфоцитов

Причиной снижения уровня основных субпопуляций лимфоцитов чаще всего является гипореактивность – преобладание тормозных процессов в организме на различных уровнях. Концентрация Т-лимфоцитов снижается при иммунологическом параличе – снижении или полном отсутствии иммунного ответа.

Сниженный показатель Т-хелперов определяется при вторичных иммунодефицитных состояниях. Количество Т-цитотоксических лимфоцитов уменьшается при аутоиммунных и аллергических заболеваниях; количество B-лимфоцитов – при перераспределении очагов воспаления; количество EK-клеток – при высоком уровне Т-лимфоцитов.

Сниженный уровень T-EK-клеток не имеет диагностического значения.

Лечение отклонений от нормы

Определение основных субпопуляций лимфоцитов в крови позволяет более глубоко исследовать состояние иммунодефицита – определить тип инфекционного агента, особенности течения заболевания, необходимость применения иммуномодуляторов.

Для интерпретации результатов анализа необходимо обратиться к иммунологу, инфекционисту или другому врачу, направившему на исследование.

Чтобы избежать повышения показателей из-за влияния физиологических факторов, нужно соблюсти все правила подготовки к процедуре сдачи крови.

Источник

Источник: https://illnessnews.ru/osnovnye-sybpopyliacii-limfocitov/

Оценка показателей клеточного иммунитета

Анализ на субпопуляцию лимфоцитов крови

Первым исследованием всегда является подсчет лейкоцитарной формулы (см. главу «Гематологические исследования»). Оцениваются как относительные, так и абсолютные значения количества клеток периферической крови.

Определение основных популяций (Т-клетки, В-клетки, натуральные киллеры) и субпопуляций Т-лимфоцитов (Т-хелперы, Т-ЦТЛ).

 Для первичного исследования иммунного статуса и выявления выраженных нарушений иммунной системы ВОЗ рекомендовано определение CD3, CD4, CD8, CD19, CD16+56, соотношение CD4/CD8.

Исследование позволяет определить относительное и абсолютное количество основных популяций лимфоцитов: Т-клетки – CD3, В-клетки – CD19, натуральные киллеры (NK) – CD3- CD16++56+, субпопуляции Т лимфоцитов (Т-хелперы CD3+ CD4+, Т-цитотоксические CD3+ CD8+ и их соотношение).

Метод исследования

Иммунофенотипирование лимфоцитов проводится c использованием моноклональных антител к поверхностным дифференцировочным ангинам на клетках иммунной системы, методом проточной лазерной цитофлуорометрии на проточных цитофлуориметрах.

Выбор зоны анализа лимфоцитов производится по дополнительному маркеру CD45, который представлен на поверхности всех лейкоцитов.

Условия взятия и хранения образцов

Венозная кровь, взятая из локтевой вены, утром, строго натощак, в вакуумную систему до указанной на пробирке метки. В качестве антикоагулянта используется К2ЭДТА. После взятия пробирку с образцом медленно переворачивают 8-10 раз для перемешивония крови с антикоагулянтом. Хранение и транспортировка строго при 18–23°С в вертикальном положении не более 24 ч.

Невыполнение этих условий приводит к некорректным результатам.

Интерпретация результатов

Т-лимфоциты (CD3+ клетки). Повышенное количество свидетельствует о гиперактивности иммунитета, наблюдается при острых и хронических лимфолейкозах. Увеличение относительного показателя встречается при некоторых вырусных и бактериальных инфекциях в начале заболевания, обострениях хронических заболеваний.

Снижение абсолютного количества Т-лимфоцитов свидетельствует о недостаточности клеточного иммунитета, а именно о недостаточности клеточно-эффекторного звена иммунитета.

Выявляется при воспалениях разнообразной этиологии, злокачественных новообразованиях, после травмы, операций, инфаркта, при курении, приеме цитостатиков.

Повышение их числа в динамике заболевания – клинически благоприятный признак.

В-лимфоциты (CD19+ клетки) Снижение наблюдается при физиологических и врожденных гипогаммаглобулинемиях и агаммаглобулинемиях, при новообразованиях иммунной системы, лечении иммунодепрессантами, острой вирусной и хронической бактериальной инфекциях, состоянии после удаления селезенки.

Увеличение отмечается при аутоиммунных заболеваниях, хронических заболеваниях печени, циррозе, муковисцедозе, бронхиальной астме, паразитарных и грибковых инфекциях. Характерно в период реконвалесценции после перенесенных острых и хронических вирусных и бактериальных инфекций. Выраженное увеличение наблюдается при хроническом В-лимфолейкозе.

NK-лимфоциты с фенотипом CD3-CD16++56+ Натуральные киллеры (NK-клетки) – популяция больших гранулярных лимфоцитов. Они способны лизировать клетки-мишени, инфицированные вирусами и другими внутриклеточными антигенами, опухолевые клетки, а также другие клетки аллогенного и ксеногенного происхождения.

Увеличение количества NK-клеток связано с активацией антитрансплантационного иммунитета, в некоторых случаях отмечается при бронхиальной астме, встречается при вирусных заболеваниях, повышается при злокачественных новообразованиях и лейкозах, в периоде реконвалесценции.

Снижение наблюдается при врожденных иммунодефицитах, паразитарных инфекциях, аутоиммунных заболеваниях, облучении, лечении цитостатиками и кортикостероидами, стрессе, дефиците цинка.

Т-лимфоциты хелперы с фенотипом CD3+CD4+ Увеличение абсолютного и относительного количества наблюдается при аутоиммунных заболеваниях, может быть при аллергических реакциях, некоторых инфекционных заболеваниях. Это увеличение свидетельствует о стимуляции иммунной системы на антиген и служит подтверждением гиперреактивных синдромов.

Снижение абсолютного и относительного количества Т-клеток свидетельствует о гипореактивном синдроме с нарушением регуляторного звена иммунитета, является патогномичным признаком для ВИЧ-инфекции; встречается при хронических заболеваниях (бронхитах, пневмониях и т.д.), солидных опухолях.

Т-цитотоксические лимфоциты с фенотипом CD3+ CD8+ Повышение выявляется практически при всех хронических инфекциях, вирусных, бактериальных, протозойных инфекциях. Является характерным для ВИЧ-инфекции. Снижение наблюдается при вирусных гепатитах, герпесе, аутоиммунных заболеваниях.

Соотношение CD4+/CD8+ Исследование соотношения CD4+/CD8+ (CD3, CD4, CD8, CD4/CD8) рекомендовано только для мониторинга ВИЧ-инфекции и контроля эффективности АРВ терапии. Позволяет определить абсолютное и относительное количество Т-лимфоцитов, субпопуляций Т-хелперов, ЦТЛ и их соотношение.

Диапазон значений – 1,2–2,6.

Снижение наблюдается при врожденных иммунодефицитах (синдром Ди-Джоржи, Незелофа, Вискотта-Олдрича), при вирусных и бактериальных инфекциях, хронических процессах, воздействии радиации и токсических химических веществ, множественной миеломе, стрессе, снижается с возрастом, при эндокринных заболеваниях, солидных опухолях. Является патогномичным признаком для ВИЧ-инфекции (менее 0,7).

Увеличение значения более 3 – при аутоиммунных заболеваниях, остром Т-лимфобластном лейкозе, тимоме, хроническом Т-лейкозе.

Изменение соотношения может быть связано с количеством хелперов и ЦТЛ у данного пациента. Например, снижение количества CD4+ Т-клеток при острой пневмонии в начале заболевания ведет к снижению индекса, а ЦТЛ при этом могут не измениться.

Для дополнительного исследования и выявления изменений иммунной системы при патологиях требующих оценки наличия острого или хронического воспалительного процесса и степени его активности, рекомендуется включать подсчет количества активированных Т-лимфоцитов с фенотипом CD3+HLA-DR+ и ТNK–клеток с фенотипом CD3+CD16++56+.

Т-активированные лимфоциты с фенотипом CD3+HLA-DR+ Маркер поздней активации, показатель гиперреактивности иммунитета. По экспрессии данного маркера можно судить о выраженности и силе иммунного ответа. Появляется на Т-лимфоцитах после 3-го дня острого заболевания.

При благоприятном течении заболевания снижается до нормы. Увеличение экспрессии на Т-лимфоцитах может быть при многих заболеваниях, связанных с хроническим воспалением.

Отмечено его повышение у пациентов с гепатитом С, пневмониями, ВИЧ-инфекцией, солидными опухолями, аутоиммунными заболеваниями.

ТNK-лимфоциты с фенотипом CD3+CD16++CD56+ Т-лимфоциты, несущие на своей поверхности маркеры CD16++ CD 56+. Эти клетки имеют свойства как Т-, так и NK-клеток. Исследование рекомендовано как дополнительный маркер при острых и хронических заболеваниях.

Снижение их в периферической крови может наблюдаться при различных органоспецифических заболеваниях и системных аутоиммунных процессах. Увеличение отмечено при воспалительных заболеваниях разной этиологии, опухолевых процессах.

Исследование ранних и поздних маркеров активации Т-лимфоцитов (CD3+CD25+, CD3-CD56+, CD95, CD8+CD38+) дополнительно назначают для оценки изменений ИС при острых и хронических заболеваниях, для диагностики, прогноза, мониторинга течения заболевания и проводимой терапии.

Т-активированные лимфоциты с фенотипом CD3+CD25+, рецeптор к ИЛ2 CD25+ – маркер ранней активации. О функциональном состоянии Т-лимфоцитов (CD3+) свидетельствует количество экспрессирующих рецепторов к ИЛ2 (CD25+).

При гиперактивных синдромах количество этих клеток возрастает (острые и хронические лимфолейкозы, тимома, отторжение трансплантата), кроме того, повышение их может свидетельствовать о ранней стадии воспалительного процесса. В периферической крови их можно выявить в первые три дня болезни.

Снижение числа этих клеток может наблюдаться при врожденных иммунодефицитах, аутоиммунных процессах, ВИЧ-инфекции, грибковых и бактериальных инфекциях, ионизирующей радиации, старении, отравлении тяжелыми металлами.

Т-цитотоксические лимфоциты с фенотипом CD8+CD38+ Присутствие CD38+ на ЦТЛ лимфоцитах отмечено у пациентов с разными заболеваниями.

Информативный показатель при ВИЧ-инфекции, ожоговой болезни.

Увеличение числа ЦТЛ с фенотипом CD8+CD38+ наблюдается при хронических воспалительных процессах, онкологических и некоторых эндокринных заболеваниях. При проведении терапии показатель снижается.

Субпопуляция натуральных киллеров с фенотипом CD3- CD56+ Молекула CD56 – адгезивная молекула, широко представленная в нервной ткани. Кроме натуральных киллеров, экспрессируется на многих типах клеток, в том число на Т-лимфоцитах.

Увеличение данного показателя свидетельствуют о расширении активности специфического клона клеток киллеров, которые имеют меньшую цитолитическую активность, чем NK-клетки с фенотипом CD3- CD16+.

Количество этой популяции возрастает при гематологических опухолях (ЕК-клеточная или Т-клеточная лимфома, плазмоклеточная миелома, апластическая крупноклеточная лимфома), хронических заболеваниях, некоторых вырусных инфекциях.

https://www.youtube.com/watch?v=23S96rk_gt0

Снижение отмечается при первичных иммунодефицитах, вирусных инфекциях, системных хронических заболеваниях, стрессе, лечении цитостатиками и кортикостероидами.

Рецептор CD95+ – один из рецепторов апоптоза. Апоптоз – сложный биологический процесс, необходимый для удаления из организма поврежденных, старых и инфицированных клеток.

Рецептор CD95 экспрессируется на всех клетках иммунной системы. Он играет важную роль в контроле функционирования иммунной системы, так как является одним из рецепторов апоптоза.

Его экспрессия на клетках определяет готовность клеток к апоптозу.

Снижение доли CD95+-лимфоцитов в крови пациентов свидетельствует о нарушении эффективности последнего этапа выбраковки дефектных и инфицированных собственных клеток, что может привести к рецидиву заболевания, хронизации патологического процесса, развитию аутоиммунных заболеваний и повышению вероятности опухолевой трансформации (к примеру, рака шейки матки при папилломотозной инфекции). Определение экспрессии CD95 имеет прогностическое значение при миело- и лимфопролифератиных заболеваниях.

Повышение интенсивности апоптоза наблюдается при вирусных заболеваниях, септических состояниях, при употреблении наркотических средств.

Активированные лимфоциты CD3+CDHLA-DR+, CD8+CD38+, CD3+CD25+, CD95. Тест отражает функциональное состояние Т-лимфоцитов и рекомендован для контроля за течением заболевания и контроля иммунотерапии при воспалительных заболеваниях разной этиологии.

Источник: https://www.cmd-online.ru/vracham/spravochnik-vracha/otsenka-pokazateley-kletochnogo-immuniteta/

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.